|
|
 |
|
|
|
UZIMANJE
UZORAKA ZA LABORATORIJSKE PRETRAGE |
|
|
|
|
Prilikom uzimanja krvi za
laboratorijske pretrage, životinja bi trebala biti natašte.
Naime, nakon obroka povećava se koncentracija triglicerida u
serumu što onemogućava izvođenje velikog broja biokemijskih
pretraga i mijenja rezultate same analize. U većini laboratorija
koriste se epruvete sa podtlakom, koje se pune automatski do
predviđenog nivoa (Vacoutainer system). Boja čepa označava vrstu
aditiva u epruveti. |
|
|
|
Hematološke pretrage |
|
Epruveta s ljubičastim čepom
(Slika 8 Epruvete c,d), u kojoj se nalazi EDTA kao
antikoagulans, služi za brojenje krvnih stanica i diferencijalnu
krvnu sliku. Epruveta s EDTA treba biti ispunjena u potpunosti
ili više od polovice. Djelomično ispunjena epruveta s EDTA
utječe na stanice zato jer je EDTA hipertonična. U epruveti s
crnim čepom (Slika 8 Epruveta b) nalazi se Na citrat, ta se
vrsta epruveta koristi za određivanje sedimentacije, dok se
epruvete s zelenim čepom i antikoagulansom heparinom (Slika 8
Epruveta a) koriste kod hematološke analize krvi ptica. Nakon
vađenja krvi epruveta se lagano okrene desetak puta i šalje u
laboratorij. Ukoliko uzorak nije moguće dostaviti u laboratorij
unutar nekoliko sati, punu krv potrebno je čuvati u hladnjaku na
temperaturi od +2 do +4°C, maksimalno 24 sata. |
|
|
|
Koagulacijske pretrage |
|
Za koagulacijske pretrage koristi
se epruveta s plavim čepom u kojoj se kao antikoagulans nalazi
3,8 % natrijev citrat (Slika 8 Epruveta f, g). Punu epruvetu
potrebno je lagano okrenuti desetak puta, vodeći računa pri tome
da nije došlo do zgrušavanja. Pri tome je punu krv potrebno, u
roku od pola sata, centrifugirati na 3000 okretaja/15 minuta, te
zatim plastičnim nastavcima uz pomoć automatske pipete odvojiti
plazmu. Plazmu kasnije možemo čuvati na temperaturi od - 20°C do
- 70°C. Važno je napomenuti da je prilikom uzimanja uzorka krvi
potrebno pažljivo izvršiti venepunkciju da ne dođe do aktivacije
faktora grušanja i agregacije trombocita. |
|
|
|
Biokemijske pretrage |
|
Za određivanje biokemijskih
pretraga potrebno je koristiti epruvete za dobivanje seruma s
žutim (crvenim) čepom, sa ili bez gela i aditiva (Slika 8
Epruveta e). Nakon zgrušavanja, koje se u pravilu kod životinja
odvija unutar 5 – 10 minuta (kod goveda pola sata), epruvetu je
potrebno centrifugirati na 3000 – 4000 okretaja/minuti (govedo
5000 okretaja/minuti) tijekom 5 – 10 minuta. Ukoliko se koriste
epruvete s gelom, gel će odvojiti korpuskularne elemente od
seruma te tako odvojen serum ne treba posebno odvajati.
Ukoliko nema gela, potrebno je
odvojiti serum u drugu epruvetu. Ako određujemo glukozu u
plazmi, a uzorak nije moguće odvojiti od krvnih stanica za manje
od 60 minuta, potrebno je koristiti epruvete s inhibitorima
glikolize, kao što je natrijev fluorid. Naime, koncentracija
glukoze izvan tijela opada s vremenom u punoj krvi zbog
glikolize. Stupanj glikolize, prosječno iznosi 5 - 7 % (~ 0,6
mmol/L) po satu, te se mijenja ovisno o koncentraciji glukoze,
temperaturi, broju leukocita i drugim čimbenicima.
Općenito postoje male razlike
između seruma i plazme, osim za neke analite. Npr. LDH, kalij i
fosfor su viši u serumu nego u plazmi, zbog oslobađanja tih
analita iz stanica za vrijeme grušanja. Proteini i globulini su
viši u plazmi nego u serumu zato jer plazma sadrži fibrinogen.
Važno je napomenuti da je većina biokemijskih parametara
stabilna 48 sati u hladnjaku. Za dulje čuvanje potrebno je serum
zamrznuti na – 20°C. |
|
|
|
Mjerenje
plinova, elektrolita, parametara kemije i hematologije |
|
Krv za određivanje plinova u krvi
potrebno je uzeti u hepariniziranu kapilarnu cjevčicu, no pri
tome je potrebno paziti da u njoj ne bude mjehurića zraka.
Cjevčicu treba zatvoriti čepovima na oba kraja i u roku od pola
sata dostaviti u laboratorij. Uzorak krvi moguće je uzeti i u
brizgalicu s heparinom, no pri tome ne dostavljati uzorke s
iglom na brizgalici već s čepićem da se održe anaerobni uvjeti.
Moguće je i uzimanje arterijske krvi u brizgalicu, tijekom
operacije. |
|
|
|
Pretraga
mokraće |
|
Mokraća se uzima u čistu posudu
(minimalno 10 ml), a najbolje je prikupiti prvu jutarnju
mokraću. Unutar dva sata mokraću je potrebno dostaviti u
laboratorij. Ukoliko to nije moguće urin je potrebno pohraniti u
hladnjaku na temperaturi od +2 do +8 °C (do 12 sati). Produljeno
stajanje uzorka može prouzročiti rast pH, proliferaciju
mikroorganizama, razgradnju staničnih elemenata i kemijskih
analita. |
|
|